Glavni razlog zaDizajn PCR laboratorijaje izbjegavanje unakrsne-kontaminacije i unakrsne-infekcije između različitih laboratorijskih zona. Stoga su zahtjevi za dovod zraka, odvod zraka i kontrolu tlaka posebno važni tijekom planiranja PCR laboratorija. Dakle, kako bi PCR laboratorij trebao biti dizajniran da zadovolji standarde biološke sigurnosti i tijeka rada? Zatim ćemo vas provesti kroz ključna načela projektiranja laboratorija za PCR, uključujući raspored laboratorija za molekularnu biologiju, planiranje laboratorija za pojačanje nukleinskih kiselina i dizajn čiste sobe za PCR testiranje.
Funkcionalne zone i raspored PCR laboratorija
Laboratorij za PCR općenito se može podijeliti u dva glavna funkcionalna radna područja: pred{0}}regiju amplifikacije i regiju amplifikacije nukleinske kiseline.
Područje pred{0}}pojačavanja uključuje prostoriju za pripremu reagensa i sobu za pripremu uzoraka. Ove dvije prostorije trebaju biti neovisne jedna o drugoj i ne smije doći do međusobne zračne komunikacije. Obje prostorije održavaju se u stanju pozitivnog tlaka u odnosu na vanjski tlak zraka.
Područje nakon-amplifikacije uključuje područje pojačanja i područje analize proizvoda, koji se mogu spojiti u jednu prostoriju kada se koristi-PCR instrument fluorescencije u stvarnom vremenu -, na primjer, u PCR laboratoriju opremljenom analizatorom HIV virusnog opterećenja. Ako je ovo područje umjesto toga podijeljeno u dvije odvojene prostorije, te sobe također moraju ostati neovisne jedna o drugoj, bez zračne međusobne komunikacije. Zona post-amplifikacije održava se pod negativnim tlakom u odnosu na vanjski tlak zraka. Ovaj dizajn gradijenta tlaka jedan je od najkritičnijih detalja koje bi kupci trebali potvrditi sa svojim partnerom za projektiranje laboratorija, jer izravno određuje može li pojačani proizvod iscuriti natrag i kontaminirati uzvodne uzorke.
Zoniranje PCR laboratorija na temelju instrumenta i tijeka rada
PCR laboratorij postavlja svoja radna područja prema funkciji korištenih instrumenata. Za standardni radni tijek lančane reakcije polimeraze obično se uspostavljaju četiri odvojena radna područja: područje za pohranu i pripremu reagensa, područje za pripremu uzorka, područje za pojačavanje i područje za analizu produkta pojačanja. Ovaj pristup četiri-zone je najčešće korištena metoda dijeljenja u konvencionalnom dizajnu PCR laboratorija.
Ako je uzorke potrebno usitniti prije ispitivanja, treba dodati dodatnu zonu drobljenja uzorka. Ako se koristi-fluorescentni PCR u stvarnom vremenu, zona umnožavanja gena i zona analize genskog proizvoda mogu se spojiti u jednu prostoriju, budući da nema potrebe za otvaranjem reakcijskih epruveta nakon umnažanja. Kada su obrada uzorka, ekstrakcija nukleinske kiseline i detekcija amplifikacije integrirani u jedan automatizirani PCR analizator, područje pripreme uzorka, područje amplifikacije i područje analize proizvoda mogu se kombinirati u jedan radni prostor.
U praksi to znači da se PCR laboratorij u načelu može konfigurirati s pet, četiri, tri ili dva odvojena radna prostora, ovisno o instrumentima i volumenu testiranja. Laboratoriji koji rade s velikom propusnošću uzoraka ili rukuju pločama s višestrukim patogenima općenito imaju koristi od više segmentiranog rasporeda s četiri- ili pet-zona, dok manji klinički ili istraživački laboratoriji s automatiziranim platformama često mogu učinkovito raditi s dizajnom s dvije- ili tri-zone.
Osnovna laboratorijska oprema za PCR
Laboratorijska oprema također je neizostavan dio dizajna PCR laboratorija. Različite instrumente i opremu treba odabrati prema specifičnim zahtjevima svakog laboratorija, uključujući: centrifuge,biološki sigurni kabineti, ultra{0}}čisti radni stolovi, sustavi za punjenje uzoraka, jedinice za elektroforezu (utori), uređaji za elektrotransfer, hibridizacijske kutije, vodene kupke, DNK sekvenceri, čitači mikropločica i perači ploča.
Prilikom odabira opreme za novi ili renovirani PCR laboratorij, isplati se rano planirati raspored stolova i komunalnih točaka (struja, plin, odvod) oko popisa opreme, umjesto nakon izgradnje - naknadno opremanje laboratorija za biosigurnosni kabinet ili centrifugu nakon činjenice da je mnogo skuplje od projektiranja unaprijed.
Zašto je dizajn PCR laboratorija važan
Kao tehnika molekularne biologije, PCR može umnožiti fragmente DNK u tragovima i, u kombinaciji sa sustavom za praćenje gena DNK, otkriti sadržaj virusa u ljudskom tijelu brže i točnije od mnogih konvencionalnih metoda. Dobro -dizajniran PCR laboratorij stoga je pouzdan temelj za medicinsku dijagnostiku, klinička ispitivanja i nadzor javnog zdravlja, pružajući naprednu, brzu i učinkovitu osnovu za-donošenje medicinskih odluka.
Često postavljana pitanja
Zašto PCR laboratorij treba odvojene zone pozitivnog i negativnog tlaka?
-
Pozitivan tlak u području pred-amplifikacije sprječava ulazak vanjskih kontaminanata, dok negativni tlak u području post-amplifikacije sprječava istjecanje umnožene DNK i kontaminaciju uzoraka drugdje u laboratoriju.
Koliko zona treba imati PCR laboratorij?
-
Ovisno o instrumentima i tijeku rada, PCR laboratorij može imati dvije, tri, četiri ili pet zona - u rasponu od potpuno odvojenih reagensa, uzorka, amplifikacije i rasporeda analize do kombiniranog postavljanja pri korištenju automatiziranih-vremenskih PCR sustava.
Koja je oprema neophodna u PCR laboratoriju?
-
Osnovna oprema obično uključuje centrifuge, biološke sigurnosne kabinete, ultra-čiste radne stolove, sustave elektroforeze, vodene kupke, DNK sekvencere, čitače mikropločica i perače ploča, odabrane na temelju specifičnih potreba testiranja svakog laboratorija.
Tko treba profesionalne usluge projektiranja laboratorija za PCR?
-
Bolnice, CDC i javnozdravstveni laboratoriji,-institucije za testiranje treće strane i biotehnološke ili farmaceutske tvrtke koje postavljaju nove objekte za testiranje nukleinske kiseline ili renoviraju postojeće laboratorije imaju koristi od profesionalnog dizajna PCR laboratorija.
Može li mali laboratorij koristiti pojednostavljeni raspored PCR laboratorija?
-
Da. Laboratoriji koji koriste automatizirane, integrirane PCR analizatore mogu kombinirati pripremu uzorka, pojačanje i analizu u manje zona, čineći tlocrt s dvije- ili tri-zone praktičnim za manje-postavke propusnosti.
Odabir partnera za projektiranje i izgradnju PCR laboratorija
Za bolnice, CDC laboratorije, treće{0}}institucije za testiranje i biotehnološke tvrtke koje planiraju novi PCR objekt ili renoviraju postojeći, odabir iskusnog partnera za projektiranje laboratorija važan je jednako kao i sam izgled. Ključni čimbenici za procjenu uključuju:
Iskustvo s biosigurnosnim gradijentima tlaka i validacijom protoka zraka
Mogućnost prilagodbe zoniranja na temelju volumena uzorka i vrste instrumenta
Kvaliteta laboratorijskog namještaja, dimovodnih napa i ventilacijskih sustava
Podrška usklađenosti za lokalnu biosigurnost i zahtjeve tipa CDC/CLIA-
Naša BOKA fokusirana je na vrhunske-laboratorije po narudžbi, pružajući laboratorijski namještaj, projektiranje laboratorija, renoviranje i usluge izmjene ventilacije. Pridržavamo se poslovne filozofije "znanstvenih i tehnoloških inovacija, potrage za savršenstvom" i "razvoja putem kvalitete, stvaranja robne marke putem usluge." Predani smo suradnji s našim klijentima kako bismo napredovali na globalnoj razini i doprinijeli boljem sutra za ljudsko zdravlje.
Planirate PCR laboratorij ili trebate renovirati postojeći objekt? Kontaktirajte naš timza prilagođeno rješenje dizajna laboratorija za PCR ili zatražite ponudu već danas kako biste dobili stručne savjete prilagođene vašim potrebama testiranja.